1. Svrha: Ovaj postupak ima za cilj osigurati standardizirani postupak za aseptične operacije i zaštitu sterilnih prostorija.
2. Područje primjene: laboratorij za biološka ispitivanja
3. Odgovorna osoba: QC Supervisor Tester
4.Definicija: Nema
5. Sigurnosne mjere opreza
Strogo provodite aseptičke postupke kako biste spriječili kontaminaciju mikrobima;operateri trebaju isključiti UV lampu prije ulaska u sterilnu sobu.
6. Postupci
6.1.Sterilna soba treba biti opremljena sterilnom operacijskom sobom i tampon prostorijom.Čistoća sterilne operacijske sobe trebala bi doseći klasu 10000. Unutarnju temperaturu treba održavati na 20-24°C, a vlažnost zraka na 45-60%.Čistoća čiste klupe trebala bi doseći klasu 100.
6.2.Sterilnu prostoriju treba održavati čistom i strogo je zabranjeno gomilanje otpadaka kako bi se spriječila kontaminacija.
6.3.Strogo spriječite kontaminaciju cjelokupne opreme za sterilizaciju i medija kulture.Oni koji su kontaminirani trebaju ih prestati koristiti.
6.4.Sterilnu prostoriju treba opremiti dezinficijensima radne koncentracije, kao što su 5% otopina krezola, 70% alkohol, 0,1% otopina klormetionina itd.
6.5.Sterilnu prostoriju treba redovito sterilizirati i čistiti odgovarajućim dezinficijensom kako bi se osiguralo da čistoća sterilne sobe zadovoljava zahtjeve.
6.6.Sve instrumente, instrumente, posuđe i druge predmete koje je potrebno unijeti u sterilnu prostoriju potrebno je dobro zamotati i sterilizirati odgovarajućim metodama.
6.7.Prije ulaska u sterilnu prostoriju, osoblje mora oprati ruke sapunom ili dezinficijensom, a zatim presvući posebnu radnu odjeću, obuću, kape, maske i rukavice u tampon sobi (ili ponovno obrisati ruke 70% etanolom) prije ulaska u sterilnu prostoriju.Izvođenje operacija u bakterijskoj komori.
6.8.Prije korištenja sterilne sobe, ultraljubičasta lampa u sterilnoj prostoriji mora biti uključena za zračenje i sterilizaciju dulje od 30 minuta, a čista klupa mora biti uključena za propuhivanje zraka u isto vrijeme.Nakon završetka operacije, sterilnu prostoriju treba na vrijeme očistiti, a zatim sterilizirati ultraljubičastim svjetlom 20 minuta.
6.9.Prije pregleda, vanjsko pakiranje ispitnog uzorka treba ostati netaknuto i ne smije se otvarati kako bi se spriječila kontaminacija.Prije pregleda, upotrijebite pamučne kuglice sa 70% alkohola za dezinfekciju vanjske površine.
6.10.Tijekom svake operacije potrebno je napraviti negativnu kontrolu kako bi se provjerila pouzdanost aseptičnog rada.
6.11.Kada upijate bakterijsku tekućinu, morate koristiti usisnu kuglu da je upijete.Nemojte dodirivati slamku izravno ustima.
6.12.Igla za inokulaciju mora se sterilizirati plamenom prije i nakon svake uporabe.Nakon hlađenja, kultura se može inokulirati.
6.13.Slamke, epruvete, petrijeve zdjelice i ostalo posuđe koje sadrži bakterijsku tekućinu treba potopiti u kantu za sterilizaciju koja sadrži 5% otopinu lizola za dezinfekciju, izvaditi je i isprati nakon 24 sata.
6.14.Ako je bakterijska tekućina prolivena po stolu ili podu, trebali biste odmah izliti 5% otopinu karbolne kiseline ili 3% Lysol na kontaminirano područje najmanje 30 minuta prije tretiranja.Kada su radna odjeća i šeširi kontaminirani bakterijskom tekućinom, treba ih odmah skinuti i oprati nakon sterilizacije parom pod visokim pritiskom.
6.15.Svi predmeti koji sadrže žive bakterije moraju se dezinficirati prije ispiranja pod mlazom vode.Strogo je zabranjeno zagađivanje kanalizacije.
6.16.Broj kolonija u sterilnoj prostoriji treba provjeravati mjesečno.S otvorenim čistim stolom uzmite određeni broj sterilnih Petrijevih zdjelica s unutarnjim promjerom od 90 mm i aseptično ubrizgajte oko 15 ml hranjivog agar medija za kulturu koji je otopljen i ohlađen na oko 45°C.Nakon skrućivanja, stavite ga naopako na 30 do 35. Inkubirajte 48 sati u inkubatoru na ℃.Nakon provjere sterilnosti, uzmite 3 do 5 pločica i postavite ih s lijeve, srednje i desne strane radnog položaja.Nakon što otvorite poklopac i izložite ih 30 minuta, stavite ih naopako u inkubator na 30 do 35°C na 48 sati i izvadite ih.ispitati, pregledati.Prosječan broj raznih bakterija na ploči u čistom prostoru klase 100 ne smije premašiti 1 koloniju, a prosječni broj u čistoj sobi klase 10000 ne smije premašiti 3 kolonije.Ako je granica prekoračena, sterilnu prostoriju treba temeljito dezinficirati dok ponovljene inspekcije ne zadovolje zahtjeve.
7. Pogledajte poglavlje (Metoda inspekcije sterilnosti) u "Metode higijenske inspekcije lijekova" i "Kineske standardne operativne prakse za inspekciju lijekova".
8. Odjel distribucije: Odjel upravljanja kvalitetom
Tehničke upute za čistu sobu:
Nakon dobivanja sterilnog okoliša i sterilnih materijala, moramo održavati sterilno stanje kako bismo proučavali određeni poznati mikroorganizam ili iskoristili njegove funkcije.U protivnom se lako mogu umiješati različiti mikroorganizmi izvana. Fenomen miješanja nebitnih vanjskih mikroorganizama u mikrobiologiji se naziva kontaminirajuće bakterije.Sprječavanje kontaminacije kritična je tehnika u mikrobiološkom radu.Potpuna sterilizacija s jedne strane i sprječavanje kontaminacije s druge dva su aspekta aseptičke tehnike.Osim toga, moramo spriječiti mikroorganizme koji se proučavaju, osobito patogene mikroorganizme ili genetski modificirane mikroorganizme koji ne postoje u prirodi, da pobjegnu iz naših eksperimentalnih spremnika u vanjski okoliš.Za te svrhe u mikrobiologiji postoje mnoge mjere.
Sterilna soba je obično mala prostorija posebno uređena u mikrobiološkom laboratoriju.Može se graditi od ploča i stakla.Površina ne smije biti prevelika, oko 4-5 četvornih metara, a visina oko 2,5 metra.Van sterilne prostorije treba postaviti tampon prostoriju.Vrata tampon sobe i vrata sterilne sobe ne bi smjela biti okrenuta u istom smjeru kako bi se spriječilo da protok zraka unese razne bakterije.I sterilna soba i tampon prostorija moraju biti hermetički zatvorene.Unutarnja oprema za ventilaciju mora imati uređaje za filtriranje zraka.Pod i zidovi sterilne prostorije moraju biti glatki, otporni na zadržavanje prljavštine i laki za čišćenje.Radna površina treba biti ravna.I sterilna soba i tampon soba opremljene su ultraljubičastim svjetlima.Ultraljubičasto svjetlo u sterilnoj sobi udaljeno je 1 metar od radne površine.Osoblje koje ulazi u sterilnu sobu treba nositi steriliziranu odjeću i šešire.
Trenutno, sterilne sobe uglavnom postoje u mikrobiološkim tvornicama, dok opći laboratoriji koriste čiste stolove.Glavna funkcija čiste klupe je korištenje uređaja za laminarni protok zraka za uklanjanje različite sitne prašine uključujući mikroorganizme s radne površine.Električni uređaj omogućava zraku da prođe kroz hepa filter i zatim uđe u radnu površinu, tako da je radna površina uvijek pod kontrolom strujanja sterilnog zraka.Štoviše, postoji zračna zavjesa velike brzine na strani blizu vanjske strane kako bi se spriječio ulazak vanjskog bakterijskog zraka.
Na mjestima s teškim uvjetima umjesto čistih klupa mogu se koristiti i drvene sterilne kutije.Sterilna kutija je jednostavne strukture i lako se pomiče.Postoje dvije rupe na prednjoj strani kutije, koje su blokirane potisnim vratima kada nisu u funkciji.Tijekom rada možete ispružiti ruke.Gornji dio prednje strane opremljen je staklom radi lakšeg unutarnjeg rada.U kutiji se nalazi ultraljubičasta lampa, a posuđe i bakterije se mogu staviti kroz mala vrata sa strane.
Aseptičke operativne tehnike trenutno ne samo da igraju ključnu ulogu u mikrobiološkim istraživanjima i primjenama, već se također široko koriste u mnogim biotehnologijama.Na primjer, transgenska tehnologija, tehnologija monoklonskih antitijela itd.
Vrijeme objave: 6. ožujka 2024