1. Svrha: Ovaj postupak ima za cilj osigurati standardizirani postupak za aseptične operacije i zaštitu sterilnih prostorija.
2. Područje primjene: laboratorij za biološka ispitivanja
3. Odgovorna osoba: Nadzornik kontrole kvalitete, tester
4. Definicija: Nema
5. Sigurnosne mjere
Strogo provodite aseptične operacije kako biste spriječili mikrobnu kontaminaciju; operateri trebaju isključiti UV lampu prije ulaska u sterilnu prostoriju.
6. Postupci
6.1. Sterilna soba treba biti opremljena sterilnom operacijskom sobom i tampon prostorijom. Čistoća sterilne operacijske sobe treba doseći klasu 10000. Unutarnja temperatura treba se održavati na 20-24°C, a vlažnost zraka na 45-60%. Čistoća čistog radnog stola treba doseći klasu 100.
6.2. Sterilnu sobu treba održavati čistom, a strogo je zabranjeno gomilanje otpada kako bi se spriječila kontaminacija.
6.3. Strogo spriječite kontaminaciju sve opreme za sterilizaciju i medija za uzgoj. Oni koji su kontaminirani trebaju prestati s njihovom upotrebom.
6.4. Sterilna soba treba biti opremljena dezinfekcijskim sredstvima radne koncentracije, kao što su 5%-tna otopina krezola, 70%-tni alkohol, 0,1%-tna otopina klormetionina itd.
6.5. Sterilnu sobu treba redovito sterilizirati i čistiti odgovarajućim dezinficijensom kako bi se osiguralo da čistoća sterilne sobe zadovoljava zahtjeve.
6.6. Svi instrumenti, posuđe i ostali predmeti koje je potrebno unijeti u sterilnu sobu trebaju biti čvrsto zamotani i sterilizirani odgovarajućim metodama.
6.7. Prije ulaska u sterilnu sobu, osoblje mora oprati ruke sapunom ili dezinficijensom, a zatim se u sobi za zaštitu od sunca presvući u posebnu radnu odjeću, obuću, kape, maske i rukavice (ili ponovno obrisati ruke 70%-tnim etanolom) prije ulaska u sterilnu sobu. Radove obavljati u bakterijskoj komori.
6.8. Prije korištenja sterilne sobe, ultraljubičasta lampa u sterilnoj sobi mora biti uključena za ozračivanje i sterilizaciju dulje od 30 minuta, a čista klupa mora biti uključena za puhanje zraka istovremeno. Nakon završetka postupka, sterilnu sobu treba na vrijeme očistiti, a zatim sterilizirati ultraljubičastim svjetlom 20 minuta.
6.9. Prije pregleda, vanjsko pakiranje ispitnog uzorka treba ostati neoštećeno i ne smije se otvarati kako bi se spriječila kontaminacija. Prije pregleda, dezinficirajte vanjsku površinu vatom sa 70%-tnim alkoholom.
6.10. Tijekom svake operacije treba provesti negativnu kontrolu kako bi se provjerila pouzdanost aseptičnog rada.
6.11. Prilikom upijanja bakterijske tekućine morate koristiti vakuumsku kuglicu. Nemojte dodirivati slamku izravno ustima.
6.12. Iglu za inokulaciju treba sterilizirati plamenom prije i poslije svake upotrebe. Nakon hlađenja, kultura se može inokulirati.
6.13. Slamke, epruvete, petrijeve zdjelice i ostali pribor koji sadrži bakterijsku tekućinu treba namočiti u sterilizacijsku kantu koja sadrži 5%-tnu otopinu Lysola radi dezinfekcije te izvaditi i isprati nakon 24 sata.
6.14. Ako se bakterijska tekućina prolije po stolu ili podu, odmah prije tretiranja kontaminiranog područja prelijte 5%-tnu otopinu karbolne kiseline ili 3%-tni Lysol i držite najmanje 30 minuta na kontaminiranom području. Kada su radna odjeća i kape kontaminirani bakterijskom tekućinom, treba ih odmah skinuti i oprati nakon sterilizacije parom pod visokim tlakom.
6.15. Svi predmeti koji sadrže žive bakterije moraju se dezinficirati prije ispiranja pod slavinom. Strogo je zabranjeno onečišćavati kanalizaciju.
6.16. Broj kolonija u sterilnoj prostoriji treba provjeravati mjesečno. S otvorenim čistim stolom, uzmite nekoliko sterilnih Petrijevih zdjelica unutarnjeg promjera 90 mm i aseptično ubrizgajte oko 15 ml hranjivog agara koji je rastopljen i ohlađen na oko 45 °C. Nakon skrućivanja, stavite ga naopako na 30 do 35 °C. Inkubirajte 48 sati u inkubatoru na 30 do 35 °C. Nakon što se dokaže sterilnost, uzmite 3 do 5 ploča i stavite ih lijevo, u sredinu i desno od radnog položaja. Nakon otvaranja poklopca i izlaganja 30 minuta, stavite ih naopako u inkubator na 30 do 35 °C na 48 sati i izvadite ih. Pregledajte. Prosječan broj raznih bakterija na ploči u čistom području klase 100 ne smije prelaziti 1 koloniju, a prosječan broj u čistoj prostoriji klase 10000 ne smije prelaziti 3 kolonije. Ako se prekorači ograničenje, sterilnu prostoriju treba temeljito dezinficirati dok ponovljeni pregledi ne zadovoljavaju zahtjeve.
7. Pogledajte poglavlje (Metoda inspekcije sterilnosti) u "Metodama inspekcije higijene lijekova" i "Kineskim standardnim operativnim praksama za inspekciju lijekova".
8. Odjel distribucije: Odjel za upravljanje kvalitetom
Tehničke smjernice za čiste sobe:
Nakon što se postigne sterilno okruženje i sterilni materijali, moramo održavati sterilno stanje kako bismo mogli proučavati određeni poznati mikroorganizam ili koristiti njegove funkcije. U suprotnom, razni mikroorganizmi izvana mogu se lako pomiješati. Fenomen miješanja nebitnih mikroorganizama izvana naziva se kontaminirajućim bakterijama u mikrobiologiji. Sprječavanje kontaminacije ključna je tehnika u mikrobiološkom radu. Potpuna sterilizacija s jedne strane i sprječavanje kontaminacije s druge strane dva su aspekta aseptične tehnike. Osim toga, moramo spriječiti da mikroorganizmi koji se proučavaju, posebno patogeni mikroorganizmi ili genetski modificirani mikroorganizmi koji ne postoje u prirodi, pobjegnu iz naših eksperimentalnih spremnika u vanjsko okruženje. U te svrhe, u mikrobiologiji postoji mnogo mjera.
Sterilna soba je obično mala prostorija posebno uređena u mikrobiološkom laboratoriju. Može se izgraditi od plahti i stakla. Površina ne smije biti prevelika, oko 4-5 četvornih metara, a visina oko 2,5 metra. Izvan sterilne sobe treba postaviti tampon prostoriju. Vrata tampon prostorije i vrata sterilne sobe ne smiju biti okrenuta u istom smjeru kako bi se spriječilo unošenje raznih bakterija strujanjem zraka. I sterilna soba i tampon prostorija moraju biti hermetički zatvorene. Unutarnja ventilacijska oprema mora imati uređaje za filtriranje zraka. Pod i zidovi sterilne sobe moraju biti glatki, nepropusni za prljavštinu i laki za čišćenje. Radna površina treba biti ravna. I sterilna soba i tampon prostorija opremljene su ultraljubičastim svjetlima. Ultraljubičasta svjetla u sterilnoj sobi nalaze se 1 metar od radne površine. Osoblje koje ulazi u sterilnu sobu treba nositi steriliziranu odjeću i kape.
Trenutno, sterilne sobe uglavnom postoje u mikrobiološkim tvornicama, dok opći laboratoriji koriste čiste stolove. Glavna funkcija čistih stolova je korištenje laminarnog uređaja za protok zraka za uklanjanje raznih sitnih čestica prašine, uključujući mikroorganizme, s radne površine. Električni uređaj omogućuje prolazak zraka kroz HEPA filter, a zatim ulazak u radnu površinu, tako da je radna površina uvijek pod kontrolom protoka sterilnog zraka. Štoviše, na strani blizu vanjske strane nalazi se zračna zavjesa velike brzine kako bi se spriječio ulazak vanjskog bakterijskog zraka.
Na mjestima s teškim uvjetima, umjesto čiste klupe mogu se koristiti i drvene sterilne kutije. Sterilna kutija ima jednostavnu strukturu i lako se pomiče. Na prednjoj strani kutije nalaze se dva otvora koja su blokirana vratima na povlačenje kada nije u upotrebi. Tijekom rada možete ispružiti ruke unutra. Gornji dio prednje strane opremljen je staklom radi lakšeg unutarnjeg rukovanja. Unutar kutije nalazi se ultraljubičasta lampa, a pribor i bakterije mogu se umetnuti kroz mala vratašca sa strane.
Aseptične operativne tehnike trenutno ne samo da igraju ključnu ulogu u mikrobiološkim istraživanjima i primjenama, već se i široko koriste u mnogim biotehnologijama. Na primjer, transgenična tehnologija, tehnologija monoklonskih antitijela itd.
Vrijeme objave: 06.03.2024.